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                間接膽紅素(IBIL)ELISA檢測試劑盒操作原理,種屬:小鼠

                更新時間:2018-09-05      瀏覽次數(shù):2073

                間接膽紅素(IBIL)ELISA檢測試劑盒操作原理,種屬:小鼠

                實驗原理

                試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。往預(yù)先包被小鼠間接膽紅素(IBIL)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠間接膽紅素(IBIL)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。

                 

                小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒

                英文名稱:Mouse IBIL ELISA Kit
                實驗類型:夾心法
                檢測范圍:0.25 μmol/L – 8 μmol/L
                低檢測限:0.1 μmol/L
                應(yīng)用范圍:血清、血漿、組織勻漿、細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它相關(guān)液體(本產(chǎn)品僅供實驗室科研及非臨床用途)

                小鼠間接膽紅素(IBIL)ELISA試劑盒組成

                試劑盒組成96孔配置48孔配置備注
                微孔酶標(biāo)板8孔×12條8孔×6條 無
                標(biāo)準(zhǔn)品0.3mL×6管0.3mL×6管
                樣本稀釋液6mL3mL
                檢測抗體-HRP10mL5mL
                20×洗滌緩沖液25mL15mL按說明書進行稀釋
                底物A6mL3mL
                底物B6mL3mL
                終止液6mL3mL
                封板膜2張2張
                說明書1份1份
                自封袋1個1個
                 

                 

                操作步驟

                1. 從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條,剩余板條用自封袋密封放回4℃。

                2. 設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔,標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL;

                3. 樣本孔中加入待測樣本50μL;空白孔不加。

                4. 除空白孔外,標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶(HRP)標(biāo)記的檢測抗體100μL,用封板膜封住反應(yīng)孔,37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

                5. 棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液(350μL),靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機洗板)。

                6. 每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。

                7. 每孔加入終止液50μL,15min內(nèi),在450nm波長處測定各孔的OD值。

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