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非蛋白質(zhì)巰基測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

更新時(shí)間：2021-05-07

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非蛋白質(zhì)巰基測(cè)試盒實(shí)驗(yàn)科研

測(cè)定意義：生物體內(nèi)巰基主要包括非蛋白質(zhì)巰基和蛋白質(zhì)巰基。巰基化合物在體內(nèi)具有重要的解毒功能，對(duì)生物體的自我調(diào)節(jié)具有非常重要的生理意義。

測(cè)定原理：巰基基團(tuán)與5,5’-二硫代-雙-硝基苯甲酸（DTNB）反應(yīng)，生成黃色化合物，在412nm處有最大吸收峰。

需要的儀器，耗材:天平、研缽、恒溫水浴鍋、可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板和甲醇。

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樣本處理

1．動(dòng)物、植物組織：稱取約 0.1g，加入 1mL 的提取液，制備成 10%的勻漿，10000g，常溫離心 10min，取上清待測(cè)。

2．細(xì)胞或細(xì)菌：按照細(xì)胞數(shù)量（10 4個(gè)）：提取液體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬(wàn)細(xì)胞加入 1mL 提取液），超聲波破碎細(xì)胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，總時(shí)間 3min）然后 10000g，常溫離心 10min，取上清置冰上待測(cè)。

3．血清（漿），培養(yǎng)液：向 0.1mL 血清（漿）或培養(yǎng)液中加入 1mL 提取液，10000g，常溫離心 10min，取上清待測(cè)。

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