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                ELISA檢測試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因

                更新時(shí)間:2021-07-28      瀏覽次數(shù):1830


                仁捷生物ELISA檢測試劑盒顯色淡,靈敏度偏低是什么原因,小編幫您找一下原因:
                以下幾點(diǎn),請注意看哦

                問題

                序號

                可能原因

                解決方法

                顯色淡,靈敏度偏低

                1

                 試劑盒未充分平衡

                試劑盒從2~8℃冰箱取出后打開盒蓋,于室溫平衡至少20分鐘,確保所有試劑已平衡至室溫(約25℃)

                2

                 樣品不適合做ELISA檢測

                樣品一般選擇培養(yǎng)上清、血清、血漿。其他樣品形式可能不適合做ELISA檢測或者需要優(yōu)化檢測的條件(例如稀釋液的成分)

                3

                 酶標(biāo)板在貯存或洗后拍干時(shí)過分干燥

                防止板過于干燥

                4

                 包被抗體遭到破壞

                操作溫和,移液槍不能碰到孔底

                5

                 樣本和抗體孵育條件不合適

                按照說明書條件,建議孵育過程中全程振蕩孵育。

                6

                 洗滌浸泡時(shí)間過長

                按照說明書操作。勿人為增加浸泡時(shí)間;

                7

                 偶聯(lián)HRP試劑污染

                棄去試劑,重新配置

                8

                 錯(cuò)誤的稀釋偶聯(lián)HRP試劑

                棄去試劑,重新配置

                9

                 TMB底物孵育時(shí)間過短,因非人為因素影響,需要優(yōu)化孵育時(shí)間

                確定合適的孵育時(shí)間:人為判定-最高濃度的標(biāo)準(zhǔn)品出現(xiàn)深藍(lán)色;S4-5有淡藍(lán)色;機(jī)器判定620 nm波長下測定OD值達(dá)到0.6-0.65

                10

                 樣本濃度過高或存在基質(zhì)效應(yīng)

                建議做不同稀釋倍數(shù),確認(rèn)樣本最佳稀釋倍數(shù)。

                11

                 酶標(biāo)儀濾光片設(shè)置有問題或者波長選擇不對

                確認(rèn)儀器設(shè)置及選擇正確的波長檢測。

                12

                 酶標(biāo)板不適合做ELISA

                不能使用細(xì)胞培養(yǎng)板,建議使用ELISA專用高吸附力板子。


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