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                ELISA試劑盒血清、血漿、細胞樣本的收集及處理方法
                
        
                更新時間：2021-10-18      瀏覽次數(shù)：2470
                
        
                 
                1、血清：用無菌管收集，室溫血液自然凝固10-20分鐘，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。
                 
                2、血漿：應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑抗凝劑，混合10-20分鐘后，2-8℃條件離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分），仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

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                4細胞樣品前處理：

                a)對于貼壁細胞：去除培養(yǎng)液，用 PBS、生理鹽水或無血清培養(yǎng)液洗一遍。按照 6 孔板每孔細胞量加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數(shù)下，使裂解液和細胞充分接觸。

                b)對于懸浮細胞：離心收集細胞，用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞量加入 150-250 ul 裂解液的比例加入裂解液，再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應(yīng)沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多，必需分裝成50-100萬細胞/管，然后再裂解。

                c)對于組織樣品： 把組織剪切成細小的碎片。按照每20mg組織加入150-250 ul裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液，如果需要高濃度的蛋白樣品，可以適當減少裂解液的用量)。

                用玻璃勻漿器勻漿，直至充分裂解。

                2、后處理：

                將裂解后的樣品10000-14000g離心3-5分鐘，取上清，即可進行后續(xù)的ELISA、Western和免疫沉淀等操作。


                 
                
        
      
                
      
                
    
                
  
                

                


                
  
                
    
                
      
      
                 
        
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